通过高效液相色谱(HPLC)分析结合LudgerTag定量单糖分析试剂盒(目录编号LT - MONO - 96)标记的2 - 氨基苯甲酸(2 - AA)单糖。
LudgerSep™ R2高效液相色谱柱包含具有十八烷基硅烷涂层的颗粒,该涂层针对疏水色谱进行了优化。
产品说明书:
https://www.ludger.com/docs/products/ls/r2/ludger-ls-r2-guide.pdf
产品规格
应用:用于分析用2 - 氨基苯甲酸(2 - AA)标记的单糖。
描述:LudgerSep™ R2高效液相色谱(HPLC)柱包含具有十八烷基硅烷涂层的颗粒,该涂层针对疏水色谱进行了优化。
颗粒:3微米硅胶经十八烷基硅烷涂层衍生化处理。孔径为175埃。
柱尺寸:
货号 直径×长度 柱体积
LS - R2 - 4.6x150 4.6×150毫米 2.49毫升
柱管:不锈钢材质
流速:典型流速为0.3 - 2.0毫升/分钟。
柱压:压力不得超过2000磅/平方英寸(psi)。
pH范围:2 - 8
温度:典型操作温度为30℃,但对于某些样品,提高温度可能改善分离度。最高温度范围为15 - 50℃。
溶剂:
溶剂A:含0.2%丁胺、0.5%磷酸、1%四氢呋喃的纯水;
溶剂B:乙腈。避免使用强氧化剂和阴离子洗涤剂。
柱保护:将所有溶剂过滤至0.2微米,并采用氦气鼓泡或真空脱气法进行脱气。在将所有样品上样到柱子之前,使用0.2微米滤膜过滤样品。在样品注射器和柱子之间安装优质的在线过滤器。如需了解最适合使用的样品和在线过滤器的建议,请联系我们。柱子的长期储存应使用至少含30%乙腈的溶剂。
适用样品:用2 - 氨基苯甲酸(2 - AA)标记的单糖。
样品制备:将样品过滤至0.2微米并避免光照。将样品溶解于溶剂A中。
样品检测:荧光检测。激发波长:360纳米;发射波长:425纳米。
操作注意事项:确保所使用的任何玻璃器皿、塑料制品或溶剂均无糖苷酶和环境碳水化合物。在所有样品处理过程中使用无粉手套,避免环境碳水化合物污染。
安全:请阅读所有使用化学品的材料安全数据表(MSDS)。所有涉及标记试剂的操作过程应采用适当的个人安全防护措施 - 护目镜、耐化学腐蚀手套(如丁腈手套)等 - 并在适当情况下在实验室通风橱内操作。
仅用于研究用途。不可用于人体或药物。
高效液相色谱系统要求
LudgerSep™ R2柱可与任何能够在0.3 - 2.0毫升/分钟流速下提供精确梯度的高效液相色谱泵系统配合使用。一般来说,在泵头之后(高压下)混合洗脱液的系统具有较低的死体积,并且能提供更精确的梯度,这对于LudgerSep柱所需的流速来说是合适的。应使用低死体积注射器(推荐Rheodyne 7125 / 9125或类似产品)。使用的进样环大小取决于分离模式和样品量。对于分析性运行,理想情况下应尽量减小样品量,通常使用10微升进样环,进样体积为1 - 5微升(部分填充)或大于10微升(完全填充)。对于电荷模式分离,通常,被柱子保留(因此在柱子上有效浓缩)的阴离子糖胺聚糖对较大进样量有较好的耐受性,而非阴离子糖胺聚糖不会被柱基质保留,并且将以与进样量成比例的体积洗脱出来 。