Ludger PNGase L酶是一种从黄杆菌属(Flavobacterium)的阿基阿内生黄杆菌(Flavobacterium akiainvivens)中克隆得到的重组糖苷糖酰胺酶。
该酶试剂盒适用于从糖蛋白和糖肽中释放所有类型(高甘露糖型、杂合型和复杂型)的N - 糖苷,包括来自非哺乳动物来源(如植物、昆虫和携带α(1 - 3)连接核心岩藻糖的寄生虫)的糖蛋白和糖肽。
该试剂盒大约可供50个样品使用 。
Ludger PNGase L酶是一种从黄杆菌属(Flavobacterium)的阿基阿内生黄杆菌(Flavobacterium akiainvivens)中克隆得到的重组糖苷糖酰胺酶。
该酶试剂盒适用于从糖蛋白和糖肽中释放所有类型(高甘露糖型、杂合型和复杂型)的N - 糖苷,包括来自非哺乳动物来源(如植物、昆虫和携带α(1 - 3)连接核心岩藻糖的寄生虫)的糖蛋白和糖肽。
该试剂盒大约可供50个样品使用 。
产品说明书链接:
https://www.ludger.com/docs/products/lz/lz-pngasel/lz-pngasel-50-kit-guide-v1.0.pdf
产品规格:
Ludger PNGase L酶是一种从黄杆菌属(Flavobacterium)的阿基阿内生黄杆菌(Flavobacterium akiainvivens)中克隆得到的重组糖苷糖酰胺酶。
应用:
Ludger PNGase酶(货号:LZ - PNGaseL - 50 - KIT)适用于溶液中N - 连接聚糖的释放。该酶在寡糖部分与蛋白质上天冬酰胺残基的连接点处,从寡糖部分最内侧的N - 乙酰葡糖胺(GlcNAc)处进行切割,随后将天冬酰胺转化为天冬氨酸。释放出的具有游离还原端的聚糖可使用Ludger标记(LudgerTag)标记技术进行标记,以实现荧光检测和高质谱灵敏度检测。
来源:黄杆菌属(Flavobacterium)的阿基阿内生黄杆菌(Flavobacterium akiainvivens)。
试剂盒包含:
货号 # | 产品 | 含量 |
LZ-PNGaseL-50 | PNGase L(来源于黄杆菌属的阿基阿内生黄杆菌) ,以20 mM柠檬酸盐 - 磷酸盐、100 mM氯化钠(pH值为6)溶液形式提供
| 1瓶,100 μL/瓶
|
LZ-10X-REACT-50 | 10倍反应缓冲液(1倍稀释时为500 mM磷酸钠,pH值7.5)
| 1瓶,350 μL/瓶
|
LZ-10X-DENAT-50 | 10倍变性溶液(含5%十二烷基硫酸钠(SDS)、400 mM二硫苏糖醇(DTT))
| 1瓶,350 μL/瓶
|
LZ-NP40SOL-50 | 10%NP - 40溶液
| 1瓶,350 μL/瓶
|
建议使用方法:
变性反应条件:
1. 用超纯水将样品体积补足至9 μL。
2. 向每个糖蛋白样品中加入1 μL的10倍变性溶液[LZ - 10X - DENAT - 50]。盖紧反应管,充分涡旋振荡,并短暂离心以确保样品完全溶解。
3. 将样品在100 °C下孵育10分钟。
4. 向每个糖蛋白样品中加入2 μL的10倍反应缓冲液[LZ - 10X - REACT - 50]。
5. 加入2 μL的10% NP - 40溶液[LZ - NP40SOL - 50]。
6. 加入4 μL水。
7. 加入2 μL的PNGase L [LZ - PNGaseL - 50]。盖紧反应管,轻轻混合并短暂离心。
8. 将样品在37 °C下孵育1小时。
非变性反应条件:
1. 用超纯水将样品体积补足至18 μL。
2. 向每个糖蛋白样品中加入2 μL的10倍反应缓冲液[LZ - 10X - REACT - 50]。
3. 加入2 - 5 μL的PNGase L [LZ - PNGaseL - 50]。盖紧反应管,轻轻混合并短暂离心。
4. 将样品在37 °C下孵育4 - 24小时。
特异性:
该酶适用于从糖蛋白和糖肽(包括来自植物、昆虫和携带α(1 - 3)连接核心岩藻糖和木糖基元的寄生虫等非哺乳动物来源)中释放多种类型的N - 糖苷(高甘露糖型、杂合型和复杂型),与PNGaseF相比,其对含分叉GlcNAc糖苷的活性较低。
样品数量:
小瓶中含有100 μL溶液。如果每次反应使用2 μL,则足够用于50个样品。
样品用量:
作为参考,每个样品最多可使用100 μg糖蛋白。
适用样品:
含有N - 连接糖苷的糖蛋白和糖肽,包括来自植物、昆虫和寄生虫等非哺乳动物来源的样品。
储存:
在4 °C下储存。避免热源和光照。
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