LudgerSep N2酰胺柱高灵敏度优势以及在药物分析中的应用

 一、LudgerSep N2酰胺柱高灵敏度优势

 （一）高分辨率与低检测限

LudgerSep N2酰胺柱具有出色的分辨率能力，能够有效分离复杂样品中的各种成分。其独特的聚合物酰胺涂层和精心设计的颗粒结构，使得不同极性和大小的分子能够在柱内实现高效分离。这种高分辨率特性为药物分析提供了更清晰的分离效果，有助于准确识别和定量目标药物成分。

同时，该柱子具备极低的检测限。在药物分析中，许多药物的浓度可能非常低，尤其是在痕量分析和药物代谢研究中。LudgerSep N2酰胺柱的高灵敏度能够检测到极低浓度的药物成分，确保即使是微量的药物也能被准确检测和分析，从而为药物质量控制、药代动力学研究等提供可靠的数据支持。

（二）优异的重复性和稳定性

高灵敏度的分析结果需要良好的重复性和稳定性来保证其可靠性。LudgerSep N2酰胺柱在这方面表现出色，能够在多次进样和长时间运行过程中保持稳定的分离性能和响应值。这意味着在不同的实验条件下，或者对于同一样品的多次分析，都能得到高度一致的结果，减少了实验误差，提高了分析结果的可信度。

（三）对复杂样品的适应性

药物样品通常是复杂的混合物，包含多种药物成分、杂质以及生物基质等。LudgerSep N2酰胺柱能够适应这种复杂性，通过优化的分离机制和涂层材料，有效地克服了复杂样品中各种成分之间的相互干扰，确保目标药物的准确检测和分析。这种对复杂样品的良好适应性使得它在药物分析领域具有广泛的应用前景。

 二、LudgerSep N2酰胺柱在药物分析中的应用

（一）药物质量控制

在药物生产过程中，严格的质量控制是确保药物安全性和有效性的关键。LudgerSep N2酰胺柱可用于药物纯度的检测，通过对药物样品进行高效分离和分析，能够准确测定药物中各种杂质的含量，包括合成过程中的副产物、降解产物等。同时，还可以用于药物的活性成分含量测定，确保药物的含量符合规定的标准范围。

（二）药物代谢研究

了解药物在体内的代谢过程对于药物的研发和应用具有重要意义。LudgerSep N2酰胺柱可用于药物代谢产物的分析，通过对生物样品（如血液、尿液、组织等）进行处理和分析，能够分离和鉴定药物在体内的代谢产物，研究其代谢途径和代谢动力学特征。这有助于深入了解药物的作用机制、药效持续时间以及潜在的药物相互作用等问题。

（三）药物制剂分析

药物制剂的组成和性质直接影响药物的稳定性和生物利用度。LudgerSep N2酰胺柱可用于分析药物制剂中的各种成分，包括药物活性成分、辅料、添加剂等。通过对制剂的分离和分析，可以评估制剂的均匀性、稳定性以及药物释放特性等，为药物制剂的质量控制和优化提供依据。

（四）药物杂质鉴定与定量

药物中的杂质可能对药物的疗效和安全性产生影响。LudgerSep N2酰胺柱能够有效地分离和鉴定药物中的各种杂质，并对其进行准确的定量分析。这对于评估药物的质量和安全性具有重要意义，特别是在药物研发和生产过程中，有助于及时发现和控制杂质的产生，确保药物符合相关的质量标准。

（五）药物生物利用度和生物等效性研究

药物的生物利用度和生物等效性是评价药物制剂质量的重要指标。LudgerSep N2酰胺柱可用于分析药物在体内的血药浓度变化情况，通过测定不同时间点的血药浓度，绘制药物的药代动力学曲线，计算药物的生物利用度和生物等效性参数。这对于比较不同药物制剂之间的差异、评估药物的疗效和安全性具有重要作用。

LudgerSep N2酰胺高效液相色谱柱 货号：LS-N2-4.6x150

产品说明书：

https://www.ludger.com/docs/products/ls/n2/ludger-ls-n2-guide.pdf

产品质量规格

应用：用于Ludger标记物（LudgerTag™）荧光基团和紫外发色团标记糖类的高效液相色谱（HPLC）分析与纯化。直径为2毫米的柱子推荐用于液相色谱 - 质谱联用（LC - MS）应用。

描述：LudgerSep™ N2高效液相色谱柱包含具有聚合物酰胺涂层的颗粒，该涂层针对复杂糖类混合物的高分辨率色谱进行了优化。

颗粒：粒径为3微米，孔径为80埃，带有聚合物酰胺涂层。

柱子规格：

  货号                             描述                                                             尺寸

LS - N2 - 4.6x150        LudgerSep N2高效液相色谱柱     4.6×150毫米 

  LS - N2 - 2.0x150          LudgerSep N2高效液相色谱柱     2.0×150毫米 

流速：典型流速为，对于4.6毫米柱为0.4 - 1.0毫升/分钟；对于2.0毫米柱为0.15 - 0.22毫升/分钟。

柱压：最大压力为，对于4.6毫米柱为2250磅/平方英寸（150千克/平方厘米）；对于2.0毫米柱为2900磅/平方英寸（195千克/平方厘米）。

pH范围：2.0 - 7.5

温度：典型操作温度为30°C，温度范围为10 - 40°C。

溶剂：糖类分析的典型溶剂体系包括乙腈和含甲酸铵的水性缓冲液的梯度，pH值为4.4。推荐的缓冲液为50毫摩尔的甲酸铵pH值4.4，有50毫升小包装可供配制2升使用（Ludger货号：LS - N - BUFFX40）。

运输溶剂：75%乙腈 - 25%水

储存：长期储存时，柱子应先用从操作缓冲液到100%水的梯度冲洗，然后再用含水量超过50%（体积比）的乙腈溶液作为储存溶剂冲洗。

柱保护：将所有溶剂过滤至0.2微米，并采用氦气鼓泡或真空脱气法进行脱气。在将所有样品上样到柱子之前，使用0.2微米滤膜过滤样品。在样品进样器和柱子之间安装在线过滤器。

样品量：可加载到柱子上的糖类样品的最大量取决于糖类组分的数量和类型以及任何非糖类物质的性质。成功进行色谱分析的典型范围为每个样品峰10飞摩尔 - 1纳摩尔，总糖量最多可达200纳摩尔。

适用样品：适用的样品包括用以下Ludger标记物™标记的糖类：2 - AA（2 - 氨基苯甲酸）、2 - AB（2 - 氨基苯酰胺）、AA - Ac（3 - （乙酰氨基） - 6 - 氨基吖啶）

样品制备：将样品过滤至0.2微米，然后使用离心蒸发器干燥。对于4.6毫米柱，将样品注入最多100微升起始缓冲液（即HPLC梯度起始时使用的溶剂混合物）中。对于2毫米柱，将样品注入最多25微升起始缓冲液（即HPLC梯度起始时使用的溶剂混合物）中。

样品检测：根据所用染料不同，可采用荧光检测、质谱检测或紫外吸收检测（参见相应的Ludger标记物™使用指南）。

操作注意事项：确保所用的任何玻璃器皿、塑料制品或溶剂均无糖苷酶和环境碳水化合物。所有样品处理程序均使用无粉手套，并避免与环境碳水化合物接触而造成污染。

安全事项：请阅读所有使用化学品的安全数据表（MSDS）。所有涉及标记试剂的操作过程都应采用适当的个人安全防护措施，如佩戴护目镜、耐化学腐蚀手套（如丁腈手套）等，并在适当情况下在实验室通风橱内操作。

仅用于研究用途，不可用于人体或药物。

高效液相色谱系统要求

LudgerSep™ N2柱可与能提供精确梯度的高效液相色谱系统配合使用，对于直径为4.6毫米的柱子，流速为0.3 - 1.0毫升/分钟；对于直径为2毫米的柱子，流速为50 - 300微升/分钟。一般来说，在高压下（泵头之后）混合洗脱液的系统死体积较低，能提供更精确的梯度，适合LudgerSep™柱所需的流速。对于4.6毫米柱，将样品注入最多100微升起始缓冲液（即HPLC梯度起始时使用的溶剂混合物）中；对于2毫米柱，将样品注入最多25微升起始缓冲液中。

需要配备荧光检测器，其检测波长如下：

荧光标记物                                                              激发波长λex（纳米）  发射波长λem（纳米） 

2 - AB [2 - 氨基苯酰胺]                                                 330                                            420 

2 - AA [2 - 氨基苯甲酸]                                                330                                             420 

AA - Ac [3 - （乙酰氨基） - 6 - 氨基吖啶]        442                                              525 

为获得最佳检测效果，使用宽狭缝宽度（例如10 - 20纳米）。采用亚皮摩尔水平的2 - AB或2 - AA标记糖类可检测到良好的信噪比（取决于所用检测器的灵敏度）。

为提高糖类分析的重复性和中间精密度，使用柱温控制器。柱温为35°C时可得到良好结果 。