内切 - β半乳糖苷酶与疾病的关系

 疾病诊断方面

- **某些遗传性疾病的辅助诊断**：一些遗传性疾病会导致体内糖基化修饰异常，而内切 - β半乳糖苷酶参与糖链的代谢过程。例如，在某些先天性糖基化障碍疾病中，由于相关基因突变，使得内切 - β半乳糖苷酶的活性或其底物的糖基化模式发生改变。通过检测内切 - β半乳糖苷酶的活性水平或者其对特定糖链的作用情况，有可能为这些疾病的诊断提供辅助依据 。

 - **肿瘤疾病标志物探索**：肿瘤细胞通常具有异常的糖基化特征。研究发现肿瘤细胞表面的聚 - N - 乙酰乳糖胺（Poly - N - acetyllactosamine，PLN）结构等相关糖链的表达模式与正常细胞不同，而内切 - β半乳糖苷酶作用于这些糖链结构。因此，研究内切 - β半乳糖苷酶在肿瘤组织与正常组织中的表达差异、活性变化等，有可能发现新的肿瘤诊断标志物。

 疾病治疗方面

 - **微生物感染相关疾病**：某些病原微生物（如细菌、病毒等）在感染宿主细胞过程中，会利用宿主细胞表面的糖链结构，其中就涉及到内切 - β半乳糖苷酶对糖链的作用。通过抑制病原微生物对内切 - β半乳糖苷酶相关糖链的利用途径，或者调节宿主细胞内该酶的活性来改变细胞表面糖链的呈现，有可能达到阻止病原微生物感染、治疗相关疾病的目的。

内切 - β半乳糖苷酶在生物制药中的应用

糖类药物生产

 - **糖疫苗制备**：许多病原体的表面抗原包含特定的糖链结构，这些糖链可以作为疫苗的重要成分。内切 - β半乳糖苷酶可用于对糖链进行精确的修饰和加工，以制备具有更高免疫原性和特异性的糖疫苗。例如，在流感病毒疫苗研发中，利用该酶对病毒表面糖蛋白上的糖链进行处理，可能增强疫苗诱导机体产生免疫反应的能力，提高疫苗的有效性 。

 - **治疗性糖蛋白修饰**：治疗性糖蛋白药物（如单克隆抗体等）的疗效和安全性与糖基化修饰密切相关。内切 - β半乳糖苷酶可以作为一种工具酶，用于对治疗性糖蛋白进行糖基化工程改造，优化其糖链结构，从而改善药物的药代动力学性质（如延长半衰期）、增强其与靶点的结合亲和力以及降低免疫原性等，提高药物的治疗效果。

疾病治疗药物开发

 - **靶向糖基化治疗药物**：基于内切 - β半乳糖苷酶在疾病发生发展过程中与糖基化的关联，开发针对该酶或其作用通路的靶向药物。例如，设计能够特异性抑制内切 - β半乳糖苷酶活性的小分子抑制剂，在某些疾病（如肿瘤）中，通过阻断该酶对肿瘤相关糖链的代谢，干扰肿瘤细胞的生长、增殖、迁移和侵袭等生物学行为，达到治疗肿瘤的目的 。  

产品说明书链接：

https://www.qa-bio.com/docs/E-XBG01.QA-Bio.specsheet.pdf

产品规格

内切β - 半乳糖苷酶可用于鉴定和去除许多生物学上重要的糖缀合物上的聚 - N - 乙酰乳糖胺结构。

来源：重组蛋白，由脆弱拟杆菌（Bacteroides fragilis）在大肠杆菌（E. Coli）中表达产生

酶学委员会编号（EC）：3.2.1.103

特异性：优先切割无分支的、重复的聚 - N - 乙酰乳糖胺[GlcNAc - β(1 - 3)Gal - β(1 - 4)]n结构中的内部β(1 - 4)半乳糖连接键。硫酸化结构（如硫酸角质素）也能被切割。底物的分支和/或岩藻糖基化可能会降低或消除切割作用。半乳糖C - 6位的硫酸化会阻断切割。新乳糖系寡糖的切割速率根据其与优选底物的偏离程度而大幅降低。例如，Gal - β(1 - 3)GlcNAc - β(1 - 3)Gal - β(1 - 4)Glc的切割速率仅为硫酸角质素的5×10⁻⁵（见参考文献4）。其特异性与大肠杆菌弗罗因德氏菌（Escherichia freundii）的酶相似，但仅限于切割促红细胞生成素四天线结构上的N - 乙酰乳糖胺延伸部分（见参考文献5）。

试剂盒包含：

Ludger内切β - 半乳糖苷酶 - 试剂盒包含：

含0.9 U酶的60 μL酶液（溶于20 mM Tris - HCl，pH 7.5）

1瓶反应缓冲液 - 250 mM磷酸钠，pH 5.8

比活性：>140 U/mg

活性：>14 U/mL

分子量：约32,000道尔顿

最适pH：5.8

建议用法：

对于糖蛋白：

1. 向试管中加入最多100 μg糖蛋白。

2. 加入4 μL 5×缓冲液，并加水至19 μL。

3. 加入1 μL酶。

4. 在37°C下孵育2小时。

寡糖的处理程序：

与上述糖蛋白的处理基本相同，但孵育时间根据底物不同需持续数小时至数天。在长时间孵育期间，为稳定蛋白质，可添加牛血清白蛋白至2 mg/mL。

比活性：

内切β - 半乳糖苷酶的一个活性单位定义为在37°C、pH 5.8条件下，每分钟从牛角膜硫酸角质素中释放出1 μmol还原糖的酶量。

稳定性：在适当储存条件下至少稳定24个月。短时间暴露于室温不会降低活性。在反应条件下至少可保持5天活性。

纯度：通过以下方法检测内切β - 半乳糖苷酶是否存在污染性蛋白酶：将10 μg变性牛血清白蛋白（BSA）与2 μL酶在37°C下孵育24小时。对处理后的BSA进行十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS - PAGE）分析，结果显示无降解迹象。

大肠杆菌生产菌株已进行广泛检测，未检测到任何可检测到的糖苷酶产生 。