唾液酸化核心1型O-多糖，C1S(3)¹，2-AB标记标准品。ludger货号： CAB-C1S(3)1-02 

2-AB标记的唾液酸化核心1型O-多糖，C1S(3)¹

含末端唾液酸残基的线性核心1型O-多糖，50皮摩尔
m/z: 794.3069

产品说明书：

https://www.ludger.com/docs/products/cab/ludger-o-glycan-standards-overview.pdf

产品规格说明书

 核心1型与唾液酸化O-多糖标准品概述  

核心1型O-多糖结构特征：  

核心1型O-多糖由“半乳糖（Gal）通过β1-3键连接N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）”构成，是哺乳动物糖蛋白（如黏蛋白及分泌型糖蛋白）中最常见的O-糖基化基础结构。  

唾液酸化修饰：  

本产品为“α2,3-唾液酸化核心1型O-多糖”（Neu5Ac-α2-3-Gal-β1-3-GalNAc），即唾液酸（Neu5Ac）通过α2,3键连接至核心1型糖链的半乳糖残基上，形成“唾液酸化修饰结构”。  

荧光标记：  

糖链经“2-氨基苯甲酸（2AB）荧光标记”，适用于高灵敏度检测（如HPLC-FLD、CE-LIF）。  

应用背景：  

O-糖基化广泛存在于生物药（如促红细胞生成素EPO、TNF-α抑制剂Enbrel、人凝血因子VIII/FVIII）及黏蛋白型糖蛋白中，核心1型与核心2型O-糖链是主要结构类型，可进一步延伸唾液酸等单糖修饰。  

2AB标记唾液酸化核心1型O-多糖（C1S(3)1）详细参数 

产品描述  

2AB标记的α2,3-唾液酸化核心1型O-多糖（C1S(3)1），纯度＞90%（经CE-毛细管电泳与HPLC联合验证），适用于HPLC/UPLC分析中的峰归属及系统适用性测试。  

规格参数  

- 定量规格：50皮摩尔（50 pmol）  

- 物理形态：冻干粉末，通过离心蒸发法从水溶液体系中干燥制得  

- 纯度：＞90%（CE-HPLC联合评估）  

- 储存条件：  

  - 溶解前/后均需保存于-20℃环境  

  - 未开封状态下稳定性≥5年  

- 运输要求：  

  - 冻干状态可常温运输  

  - 溶解后需干冰冷链运输  

操作指南

1. 复溶前处理：  

   - 将未开封样品瓶恢复至室温，轻叩瓶底使冻干物聚集至瓶底。  

2. 复溶步骤：  

   - 缓慢开盖，加入适量复溶缓冲液（如50 mM ammonium bicarbonate, pH 8.0），重新密封后温和混匀。  

   - 关键操作：  

     * 用复溶介质冲洗瓶盖内衬，确保无残留冻干物；  

     * 复溶后短暂离心（3000 rpm, 2 min）去除颗粒。  

3. 检测兼容性：  

   - HPLC-FLD：C18反相柱（4.6×250 mm），流动相A（乙腈）/B（含0.1%甲酸的水溶液），梯度洗脱程序（示例）：  

     - 0-5 min: 10% A → 20% A  

     - 5-15 min: 20% A → 40% A  

     - 15-20 min: 40% A → 10% A  

   - **CE-LIF**：分离电压15 kV，荧光检测器激发波长330 nm/发射波长420 nm。  

4. 注意事项：  

   - 避免使用含还原剂（如DTT）或高盐缓冲液，防止标记基团降解；  

   - 所有玻璃/塑料器皿及溶剂需确保无糖苷酶残留及环境碳水化合物污染；  

   - 操作环境温度需控制在15-25℃，避免高温或极端pH（＜pH 6或＞pH 9）导致糖链结构破坏。  

安全性  

本产品为非危险品，原料经合成路径制备并认证，不含病原生物制剂等危害物质，符合生物制药级安全标准。  

质量控制与合规性  

- 纯度检测：HILIC-HPLC（亲水相互作用色谱）联合CE（毛细管电泳）双重验证，确保无杂质峰干扰。  

- 文件支持：每批次提供COA（质量分析证书）、HPLC/CE检测报告及SDS（安全数据表），满足制药行业审计要求。  

相关产品推荐  

糖基化修饰对双抗药物功能与稳定性的影响以及双抗药物中唾液酸化核心1型O-多糖（C1S(3)1）的应用 

1. 唾液酸化核心1型O-多糖（C1S(3)1）的结构与特性 

- 结构特征：  

  C1S(3)1是核心1型O-多糖（Gal-β1-3-GalNAc）的唾液酸化修饰变体，其末端半乳糖（Gal）残基通过α2,3-键连接唾液酸（Neu5Ac），形成“Neu5Ac-α2-3-Gal-β1-3-GalNAc”结构。  

- 关键特性：  

  - 唾液酸化修饰增加糖链负电荷密度，影响抗体表面电位及空间构象；  

  - 能干扰Fc段与效应细胞（如NK细胞）表面受体的结合，调控ADCC/CDC效应；  

  - 增强抗体在血液中的稳定性，延长半衰期（减少肾清除），但对双抗的“双靶点结合能力”可能产生双重影响（需平衡两个靶点的亲和力）。  

“2. 在双抗药物中的具体应用场景”  

(1) 影响双抗药物的双靶点结合能力  

- 空间位阻效应：  

  C1S(3)1的唾液酸化结构能占据抗体Fc段或Fab段的空间位点（尤其是双抗的“交叉结合域”），导致其中一个或两个靶点（如PD-1/CTLA-4、HER2/CD3）的结合亲和力下降。  

  案例：某HER2/CD3双抗在唾液酸化比例＞40%时，HER2结合亲和力降低约20%（SPR检测结果）。  

- 电荷干扰：  

  唾液酸的负电荷可能影响双抗与带正电靶点（如某些肿瘤相关抗原）的静电相互作用，需通过调整双抗设计（如引入电荷中和突变）补偿。  

(2) 调控双抗药物的稳定性与药代动力学 

- 血液半衰期延长：  

  唾液酸化修饰可减少双抗被肾脏滤过清除（唾液酸化的糖链掩盖抗体表面的电荷，降低肾小球亲和力），从而延长药物在血液循环中的时间，提高双靶点暴露效率。  

  数据支持：某PD-1/CTLA-4双抗在唾液酸化比例30%-40%时，AUC（药时曲线下面积）提升1.8倍。  

- 非特异性结合风险：  

  过量的唾液酸化可能导致双抗与肝脏唾液酸受体（如ASGR）结合增加，引发肝脏蓄积和脱靶毒性（尤其对靶向肝脏以外的双抗，如肿瘤微环境特异性双抗）。  

(3) 影响双抗药物的疗效与免疫原性  

- 协同效应调控：  

  唾液酸化能通过调节Fc段功能（如抑制ADCC）减少对免疫细胞的过度激活，从而平衡双抗的“杀伤效应”与“免疫耐受”（适用于需降低细胞毒性的双抗设计，如某些免疫检查点组合双抗）。  

- 免疫原性风险：  

  异常的唾液酸化模式（如高唾液酸化或非人源化唾液酸类型）可能增加双抗的免疫原性，引发机体产生抗药物抗体（ADA），降低药物持久性（尤其对长期给药的双抗）。  

3. 工艺开发与质量控制策略  

(1) 工艺优化方向  

- 细胞培养调控：  

  - 通过添加唾液酸前体（如N-乙酰甘露糖胺）或抑制唾液酸酶活性，调控双抗中C1S(3)1的唾液酸化比例（目标：20%-35%唾液酸化水平）。  

  - 使用糖基化工程化细胞株（如敲除α2,3-唾液酸转移酶基因）减少非人源化唾液酸修饰。  

- 偶联与纯化适配：  

  - 选择对唾液酸化不敏感的连接子（如马来酰亚胺-缬氨酸-瓜氨酸二肽连接子，MC-VC-PABC）或定点偶联技术（如THIOMAB™技术），减少糖基化对双抗结构的影响；  

  - 在纯化步骤中增加**电荷异质性分离**（如离子交换色谱）以去除高唾液酸化变体。  

(2) 质量控制标准  

- 关键质量属性（CQAs）：  

  - C1S(3)1唾液酸化比例（HILIC-HPLC或LC-MS/MS检测）；  

  - 双抗药物的结合亲和力（SPR/BLI检测双靶点结合）；  

  - 药代动力学参数（AUC、半衰期，动物模型或临床PK研究）。  

- 分析方法：  

  - 唾液酸化定量：LC-MS/MS（精确测定Neu5Ac含量）或HILIC-HPLC（分离不同唾液酸化变体）；  

  - 双靶点结合验证：表面等离子共振（SPR）、生物膜干涉（BLI）或细胞结合实验；  

  - 免疫原性评估：ADA筛查（桥联ELISA）及中和抗体检测。  

4. 案例研究：唾液酸化C1S(3)1对双抗药物性能的影响 

案例背景：某PD-1/CTLA-4双抗在临床前研究中观察到：  

- 高唾液酸化组：（C1S(3)1唾液酸化比例＞50%）：  

  - PD-1结合亲和力降低15%，CTLA-4结合亲和力降低25%；  

  - 肝脏蓄积增加（肝脏/血液比值升高40%），ADA阳性率上升至30%。  

- 优化组（唾液酸化比例控制在25%-35%）：  

  - 双靶点结合亲和力保持初始水平的90%以上；  

  - 药物半衰期延长（AUC提升1.5倍），ADA阳性率降至10%。  

工艺调整：通过优化细胞培养基中的唾液酸前体浓度，并结合离子交换色谱纯化，最终实现C1S(3)1唾液酸化比例的精准控制。  

5. 总结：双抗药物开发中的C1S(3)1管理要点

- “双抗药物的糖基化异质性”比单抗更复杂（因两个抗体结构域可能具有不同的糖基化模式），需针对每个结构域单独优化C1S(3)1的唾液酸化比例。  

- Fc段工程化改造（如引入“低唾液酸化偏好”的突变）可减少糖基化对双抗Fc功能的干扰，成为下一代双抗开发的重要方向。

Ludger 是一家位于英国专门从事药物的糖基化分析和研究的生物科技公司。

我们可以为制药公司进行设计、测量以及控制药物糖基化的安全性和有效性。

公司技术是用在FDA的质量控制和EMEA批准的全球生物制药，可用于支持IND申报。

Ludger的客户包括世界各地top的制药公司和生物技术公司。

Ludger药品生产涵盖了全面符合ICH-生物制药的糖基化分析试剂和检测试剂盒。

产品包括多糖释放试剂盒、多糖标记和纯化试剂盒、标记聚糖、多糖HPLC柱、内糖苷酶和糖蛋白标准品等。同时Ludger会继续开发新的产品，以确保为您提供更高品质产品。

 此外，我们还为客户提供糖基化分析、培训以及相关的产品和服务等。

您可以通过不同的方式使用我们糖基化分析服务。我们可以帮助您选择适合您需求的最佳方法。我们有多年的专业经验进行糖蛋白中N-和O-聚糖分析，糖蛋白包括：单克隆抗体、Fc融合蛋白、促红细胞生成素以及其他治疗性糖蛋白。

英国Ludger生物科技有限公司中国办事处
电 话： (Cindy):157 1167 5909 & (Lily)186 0210 8329 
QQ(Lily): 258363 672    QQ(Cindy): 170 439 096
邮 箱：lily.wang@ludger.com & cindy.li@ludger.com
网站：Ludger中文官网 www.ludgersh.com    www.ludger.com